第一部分 原发性骨髓纤维化患者基因突变的研究 第二部分 原发性骨髓纤维化患者的细胞遗传学研究 第三部分 血清铁蛋白是中国骨髓增生异常综合征中危-1组患者的独立预后因素

【摘要】研究目的探讨原发性骨髓纤维化(PMF)患者ASXL1、IDH1/2、SRSF2、CALR和MPL基因突变及其临床意义。研究方法对484例PMF患者按2008年WHO诊断分型标准进行回顾性诊断,随访患者判定预后。应用直接测序法检测ASXL1第12外显子、IDH1第4外显子、IDH2第4外显子、SRSF2第1外显子、CALR第9外显子和MPL第10外显子突变状态,克隆后测序鉴定突变类型。比较基因突变患者与野生型患者的临床及实验室特征。结果127例PMF患者中ASXL1基因突变36例(28%),SRSF2基因突变2例(1.6%),未检出IDH1/2基因突变病例。ASXL1突变均为杂合突变,基因突变类型均为移码突变或无义突变,以G646Ffs*12最为常见。与不伴有ASXL1基因突变患者相比,伴有ASXL1的PMF患者外周血白细胞计数较高(P=0.004),脾脏肿大程度更明显(P=0.001),年龄>65岁者比例较高(P=0.054),染色体核型异常者比例较高(P=0.033)。两者在外周血血红蛋白浓度、血小板计数、外周血原始细胞比例、JAK2V617F突变率、DIPSS-plus染色体预后分组及DIPSS、DIPSS-Chinese和DIPSS-plus预后分组方面无显著差异。357例PMF患者中JAK2V617F基因突变178例(50%),MPL基因突变11例(3%),CALR基因突变76例(21%),CALR突变均为杂合性移码突变,其中L367fs*46(Ⅰ类突变)26例(34%),K385fs*47(Ⅱ类突变)47例(62%)。与伴有JAK2V617F患者相比,伴有CALR基因Ⅱ类突变的PMF患者年龄较小(P<0.001),外周血白细胞计数(P<0.001)和血红蛋白浓度(P=0.001)较低,外周血原始细胞比例较高(P=0.009),DIPSS和DIPSS-Chinese预后分组较高危组比例较高(P<0.001)。CALR基因Ⅱ类突变患者中外周血血小板计数异常者比例较高(<100×109/LP=0.01or>450×109/LP=0.042),脾脏肿大者比例较低(P=0.004)。伴有CALRII类突变的患者较伴有JAK2V617F突变患者总生存期明显缩短(P=0.003)。CALRII类突变是独立于DIPSS-Chinese预后积分系统的不良预后因素(P=0.002,HR2.153,95%CI,1.32-3.51),而ASXL1突变并非不良预后因素。结论ASXL1基因突变是中国PMF患者中常见的表观遗传学相关基因突变但其并非不良预后因素。CALR基因突变在非JAK2V617F或MPL基因突变的PMF患者中具有较高的突变率。伴有CALRⅡ类突变的患者较伴有JAK2V617F突变患者总生存期明显缩短,CALRⅡ类突变是独立于DIPSS-Chinese的不良预后因素。研究目的探索原发性骨髓纤维化(PMF)患者的细胞遗传学异常及其预后意义研究方法回顾性分析439例具有可分析染色体核型结果的原发性骨髓纤维化患者临床资料,应用Kaplan-Meier,Log-rank检验及COX回归模型评估影响预后的因素。结果439例具有可分析染色体核型结果的PMF患者中异常染色体核型者123例(28%),其中复杂核型24例(20%),单倍体核型15例(12%),单纯+8核型异常21例(17%),单纯20q-核型异常15例(12%),单纯13q-核型异常9例(7%)。24例复杂核型中单倍体核型14例(58%)。123例染色体核型异常的PMF患者中,复杂核型者与非复杂核型者相比,伴有贫血的患者比例较高(P=0.016),两者间年龄、性别、外周血白细胞计数、血小板计数、原始细胞比例、脾脏大小、体质性症状和DIPSS预后分组无显著差异。单倍体核型者与非单倍体核型者相比,两者间年龄、性别、外周血血红蛋白浓度、白细胞计数、血小板计数、原始细胞比例、脾脏大小、体质性症状和DIPSS预后分组无显著差异。单因素生存分析显示染色体核型异常、DIPSS-plus不良预后核型、单倍体核型和复杂核型是不良预后因素(P=0.007,0.022,0.032,0.034)。多因素分析显示单倍体核型是独立于DIPSS-Chinese的不良预后因素(P=0.003,HR3.339,95%CI1.514-7.367)。结论中国PMF患者中染色体核型异常者比例较低,复杂核型、单纯+8核型异常、单纯20q-核型异常和单纯13q-核型异常为最常见的染色体核型异常。单倍体核型是独立于DIPSS-Chinese的不良预后因素。研究目的：分析原发初治骨髓增生异常综合征(MDS)IPSS中危-1组患者的预后因素。研究方法：回顾性分析191例原发初治MDSIPSS中危-1组患者的临床资料并进行统计学分析。结果：191例患者中位随访时间21(1-88)个月,中位生存期52个月。单因素分析中,血清铁蛋白≥500ug/L是原发初治MDSIPSS中危-1组的不良预后因素(P<0.001)。此外,年龄≥60岁、ECOG体力状况评分≥2分、血小板(PLT)≤50×109/L、中性粒细胞绝对值(ANC)≤0.5×109/L、、骨髓造血组织面积>80%、骨髓纤维化程度≥MF-1、骨髓细胞涂片原始细胞比例>5%,不良染色体核型亦是不良预后因素(P值分别为0.002、0.006、0.001、0.0031、0.011、0.006、0.011和0.012)。虽然血红蛋白浓度(HGB)和血清铁蛋白呈负相关,但HGB并不影响患者预后(P>0.05)。将上述单因素分析有预后意义的参数纳入COX多因素模型筛选,血清铁蛋白、ECOG体力状况评分、ANC、骨髓涂片原始细胞比例和染色体核型具有独立预后意义(P值分别为0.001、0.01、0.032、0.001和0.017)。选取血清铁蛋白、ECOG体力状况评分、ANC、骨髓涂片原始细胞比例和染色体核型提出了一个针对中国原发初治MDSIPSS中危-1组进行再次危度分层的预后积分系统,低危组、中危组、高危组患者的3年预期生存(PS)率别为83.7%、59.8%和27.7%,经Log-rank检验各组总体生存(0S)率差异有统计学意义(P<0.001)。结论：这一新的预后积分系统有望对原发初治MDSIPSS中危-1组患者进行二次预后分层,对于高危患者早期采取干预性治疗具有指导意义。
【作者】李冰；
【导师】肖志坚；
【作者基本信息】北京协和医学院，内科学（专业学位），2014，博士
【关键词】基因突变；原发性骨髓纤维化；预后；单倍体核型；DIPSS预后积分系统；DIPSS-plus预后积分系统；骨髓增生异常综合征；铁蛋白；

【参考文献】
[1]王锦,龚春辰,曹百川,刘德民,曹成艳,丁红.铁路机务段含油污水处理及污泥处置调研分析[J].铁路节能环保与安全卫生,2014,01:12-14.
[2]周悦.人工关节假体生物力学建模分析[D].河南科技大学,计算机应用技术,2014,硕士.
[3]徐同杰.GABA_B受体变构调节剂CGP7930构效关系的研究[D].华中科技大学,生物物理学,2013,硕士.
[4]刘念.高速经编机梳栉横移振动研究[D].江南大学,纺织工程,2012,硕士.
[5]杨自刚.黄土场地桩基正负摩阻力现场试验研究[D].兰州理工大学,结构工程,2013,硕士.
[6]杨攀.非接触式心电信号检测系统研究[D].浙江大学,生物医学工程,2013,硕士.
[7]熊琦.A物流公司仓储运作流程标准化研究[D].兰州大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[8]吴秋灵.中压变频器在柳钢转炉除尘风机中的应用[J].冶金自动化,2004,03:63-66.
[9]刘致平,刘磊.AutodeskInventor2009评测报告[J].CAD/CAM与制造业信息化.2008(06)
[10]白艳玲.CLEC观照下非英语专业大学生写作中动词时态错误分析[D].宁夏大学,英语语言文学,2014,硕士.
[11]黄景欢.高迁移率族蛋白1及髓过氧化物酶预测冠状动脉病变程度及斑块易损性的临床研究[D].山东大学,内科学,2013,硕士.
[12]秦伟.多模态表情识别在SEEE模型中的应用研究[D].安徽建筑大学,市政工程,2013,硕士.
[13]王睿琛,薛安成,毕天姝,黄少锋.继电保护装置时变失效率估算及其区域性差异分析[J].电力系统自动化,2012,05:11-15+23.
[14]贾佳丽.基于消费者视角的猪肉加工企业社会责任的实证研究[D].南京农业大学,产业经济学,2012,硕士.
[15]刘卡.小麦杂交种与亲本之间差异表达EST的克隆和鉴定[D].中国农业大学,作物遗传育种,2004,硕士.
[16]李鹏.麦克维尔公司营销策略研究[D].西南交通大学,工商管理,2012,硕士.
[17]刘绍新,王建民,金昌赫,刘占杰,张国富.大庆长垣油田主城区高精度三维地震激发技术[J].石油地球物理勘探,2010,S1:30-34+239+246-247.
[18]陶汝霖.现代原子光谱分析技术对提高机械产品质量的作用[J].机械工程.1987(03)
[19]毕冬艳.W-型双势阱中量子遂道效应的研究[D].陕西师范大学,光学,2004,硕士.
[20]李俊宏.微通道中高浓度悬浮液流动及颗粒分布的CFD模拟[D].重庆大学,化学工程与技术,2014,硕士.
[21]王慧颖.糖尿病患者疾病不确定感状况及影响因素的分析[D].黑龙江中医药大学,护理学,2013,硕士.
[22]尹雪.企业IPO造假的博弈分析[D].山东财经大学,会计（专业学位）,2014,硕士.
[23]王洪良.TACE联合索拉非尼治疗中晚期肝细胞性肝癌疗效的系统评价[D].广西医科大学,肿瘤学（专业学位）,2013,硕士.
[24]牛钢.我国财产保险市场的现状及前景[D].吉林大学,国民经济学,2004,硕士.
[25]刘玉仙.写前活动对提高学生写作能力的作用[J].山东师范大学外国语学院学报(基础英语教育),2005,05:23-25.
[26]侯二娜.分布式MRS-TEM联用探测系统原理样机研制[D].吉林大学,测试计量技术及仪器,2014,硕士.
[27]刘娟.流程知识表示系统的设计与实现[D].大连理工大学,系统工程,2004,硕士.
[28]铉欣.基于多描述标量量化的分布式视频编码[D].西安电子科技大学,通信与信息系统,2012,硕士.
[29]林爽.基于PVDF共聚物掺杂金属及金属氧化物复合介电材料的制备及性能研究[D].北京化工大学,2013.
[30]侯发欣.供应链中制造企业与物流企业的合作模式及若干关键技术研究[D].重庆大学,机械制造及其自动化,2004,硕士.
[31]韩钟琦.煤炭行业生产禁止性条件研究[D].大连海事大学,法律,2012,硕士.
[32]夏祥.安阳市洹水公园景观文化分析[D].内蒙古农业大学,风景园林,2013,硕士.
[33]钱迎博.时滞脉冲微分方程解的振动性[D].曲阜师范大学,应用数学,2013,硕士.
[34]石丽.聚氨酯/无机氧化物共混膜的制备及其氧氮渗透性能研究[D].江南大学,2013.
[35]王世杰.Ctais前端涉税信息处理系统的研究与实现[D].电子科技大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[36]朗宝真.CDMA短消息中心功能要求[J].电信网技术.2003(03)
[37]刘红.中药联合心理干预预防银屑病复发效果的观察[D].河北医科大学,中医外科学,2013,硕士.
[38]许力飞.我国城市生态文明建设评价指标体系研究[D].中国地质大学,资源产业经济,2014,博士.
[39]余鹏钧.南方某市供水管网健康评价指标体系及模型构建研究[D].广东工业大学,市政工程,2013,硕士.
[40]杨建东.虚拟试衣系统的研究[D].北京服装学院,机械电子工程,2012,硕士.
[41]方杰.美洲黑杨不同无性系对分月扇舟蛾的抗性及其机理[D].南京林业大学,森林保护学,2004,硕士.
[42]黄裔.基于多重巨构结构体系的超高层建筑表现研究[D].西南交通大学,建筑设计及其理论,2012,硕士.
[43]王霞.当代中国民间道德力量研究[D].南京师范大学,思想政治教育,2014,博士.
[44]戴立业.一汽—大众知识管理系统的分析与设计[D].吉林大学,2004.
[45]周秀珍.光纤激光器的双波长干涉及动态解调技术[D].南京师范大学,物理电子学,2012,硕士.
[46]付用现.启蒙话语下的白话文论争[D].湖南师范大学,中国现当代文学,2004,硕士.
[47]车栩龙.连铸坯感应加热过程建模与优化控制研究[D].杭州电子科技大学,系统工程,2014,硕士.
[48]程琳.云南勐满金矿床的矿床地球化学特征及成因分析[D].中国地质大学（北京）,矿物学、岩石学、矿床学,2014,硕士.
[49]王苏弘.注意缺陷多动障碍儿童神经网络的功能影像学研究[D].中南大学,临床医学,2014,博士.
[50]郭大军.一种新型无源TPMS系统的设计[D].湖南大学,车辆工程,2012,硕士.